|
СКАЧАТЬ (15.0 Кб в архиве, формат MS Word) |
|
|
ПРИ ПУБЛИКАЦИИ МАТЕРИАЛОВ ССЫЛКА НА ИСТОЧНИК ОБЯЗАТЕЛЬНА !!! |
|
Современные подходы к лабораторной диагностике респираторных инфекций
Е.В. Щетинин – заведующий кафедрой патологической физиологии, д.м.н.,
М.В. Батурина – научный сотрудник,
В.А. Батурин – заведующий кафедрой клинической фармакологии, д.м.н., профессор
ГБОУ ВПО “Ставропольский государственный медицинский университет” Министерства здравоохранения РФ,
ООО “Центр клинической фармакологии и фармакотерапии”, г. Ставрополь, Россия
Адекватный выбор антибактериального препарата при инфекционных процессах реализуется при наличии объективной информации о составе возбудителей и их чувствительности к противомикробным препаратам (ПМП). Обязательное проведение бактериологических исследований позволяет не только накапливать подобную информацию, но и решать вопросы о выборе терапии или ее смене при неэффективности. Приоритетным направлением современного здравоохранения в области диагностики можно считать приближение микробиологического диагностического комплекса к пациенту с применением воспроизводимых методов [2,5].
Учитывая распространенность и значимость микоплазменных инфекций, проведен анализ 10-летнего опыта работы “Центра клинической фармакологии и фармакотерапии”
в г. Ставрополе по контролю за возбудителями инфекций респираторного тракта с оценкой роли различных микроорганизмов, включая Mycoplasma pneumoniae, в общей структуре возбудителей.
Материалы и методы
C
2000 года обследовано более 20000 пациентов с внебольничными инфекциями респираторного тракта обратившихся в поликлиники, а также госпитализированных в стационары г. Ставрополя, после лечения в условиях поликлиники. Исследовались мазки из зева, носа, пунктаты пазух носа, мокрота.Получение, сбор и транспортировку патологического биологического материала от пациентов, посев первичного материала, выделение чистой культуры микроорганизмов и определение чувствительности к ПМП диско-диффузионным и иными методами производили в соответствии с установленными правилами [1,4,7,8]. Кроме того, в первые же сутки клинический материал исследовался методом прямой иммунофлюоресценции с использованием антимикоплазменных антител (ООО “Ниармедик плюс”, Россия). При положительном результате, материал от пациента подвергался дальнейшему исследованию с помощью тест-систем для выделения и определения чувствительности к ПМП
Mycoplasma pneumoniae (“Пневмо-тест” НПО “Иммунотэкс”, Россия). Метод позволяет в сроки от 48 до 72 часов выявить ферментативную активность жизнеспособных форм Mycoplasma pneumoniae и получить результат по оценке резистентности респираторных микоплазм к эритромицину, кларитромицину, азитромицину, тетрациклину, доксициклину, ципрофлоксацину, офлоксацину с использованием значений МПК и фармакокинетических/фармакодинамических характеристик препаратов.Для проведения бактериологических исследований использовались расходные материалы производства “
Becton Dickinson”, США; “Sigma”, США; “bioMerieux”, Франция; “COPAN”, Италия; “Аквапаст”, Россия; ООО “Ниармедик плюс”, Россия; ООО НПО “Иммунотэкс”, Россия.Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием методов параметрической и непараметрической статистики, реализованных в пакете программы
Excel для Windows XP (Microsoft Co).Для оценки достоверности различий в связанных выборках применялся критерий Фишера. Различия считались достоверными при
p?0,05.Таблица 1. Структура возбудителей обострений хронического рецидивирующего тонзиллита/фарингита
|
Возбудитель |
% от общего числа больных, с бактериологически подтвержденным диагнозом (n-425) |
|
Streptococcus pyogenes |
45,2% |
|
Streptococcus pneumoniae |
7,8% |
|
Enterococcus faecalis |
3,5% |
|
Staphylococcus aureus |
26,8% |
|
Enterobacteriaceae spp. |
15,3% |
|
Mycoplasma pneumoniae |
24,5% |
Результаты
Тонзиллиты, фарингиты. При острых тонзиллитах/фарингитах (обследовано 5678 больных)
Streptococcus pyogenes выделен в 20% случаев. При рецидивирующих формах заболевания (всего 668 больных) диагноз бактериологически подтвержден у 425 (63,6%) обследованных, при этом выделено 523 штамма микроорганизмов. Стрептококковый процесс выявлен у 37% обследованных больных, что составило 45% от числа пациентов, у которых диагноз был подтвержден бактериологическими методами. В 24,5% случаев выделена Mycoplasma pneumoniae (таблица 1). В ассоциациях с микоплазмами или стрептококками у 98 пациентов были идентифицированы Staphylococcus aureus и/или представители Enterobacteriaceae spp.Таблица 2. Общая структура возбудителей острых синуситов в зависимости от возраста обследованных
|
Возбудитель |
Всего (n-380) |
До 7 лет (n-89) |
7-35 лет (n-230) |
Старше 35 лет (n-61) |
|
Streptococcus pneumoniae |
48,2% |
73% |
42,6%* |
32,8%* |
|
Staphylococcus aureus |
18,9% |
9% |
23,9%* |
14,8% |
|
H.influenzae |
19,7% |
10,1% |
23,9%* |
18% |
|
Enterobacteriaceae spp. |
5,3% |
6,7% |
3,1% |
11,4% |
|
Mycoplasma pneumoniae |
7,9% |
1,2% |
6,5%* |
23%* |
* – р<0,05 в сравнении с показателями группы больных в возрасте до 7 лет.
За весь период исследований не было выделено ни одного штамма Streptococcus pyogenes, резистентного к беталактамным антибиотикам, ванкомицину и левофлоксацину. Количество резистентных к эритромицину стрептококков группы А за 10 лет увеличилось с 6,2% в 2001 году до 12,4% – в 2010 году. К левомицетину резистентность осталась на прежнем уровне: 35-38% во все периоды исследования.
Таблица 3. Структура микроорганизмов, выделяемых при внебольничных инфекциях респираторного тракта в поликлиниках г. Ставрополя, с учетом диагноза (% от общего числа выделенных штаммов)
|
Возбудитель |
Пневмония (n-811) |
Хронический |
ХОБЛ (n-661) |
|
Streptococcus pneumoniae |
42,8% |
37,8%* |
45% |
|
Staphylococcus spp. |
3,3% |
6,6%* |
8,9%* |
|
H.influenzae |
5% |
15,6%* |
8,9% |
|
Enterobacteriaceae spp. |
14,4% |
21,2% |
21,8% |
|
Pseudomonas aeruginosa |
0% |
2,8%* |
2,4% |
|
Mycoplasma pneumoniae |
34,5% |
16%* |
13%* |
* – р<0,05 в сравнении с данными, полученными в группе больных с ВП.
Синуситы. При синуситах диагноз бактериологически был подтвержден у 380 пациентов из 710 обследованных. Результаты свидетельствуют, что в пунктатах чаще всего определяются
Streptococcus pneumoniae, H.influenzae, Staphylococcus aureus и энтеробактерии. Достаточно часто обнаруживалась и Mycoplasma pneumoniae. Вместе с тем, доля отдельных микроорганизмов в общей структуре отличалась в разных возрастных категориях обследованных (таблица 2). В частности, у старших пациентов уменьшается доля выделяемых пневмококков, а вероятность выявления в пунктатах ассоциаций микроорганизмов увеличивается. В частности, в возрастной группе до 35 лет часто сочетаются пневмококки и гемофильные палочки со стафилококками. У пациентов старше 35 лет повышается вероятность ассоциации с Mycoplasma pneumoniae.Таблица 4. Количество резистентных к ПМП штаммов Streptococcus pneumoniae, выделенных в разные годы исследования
|
Годы исследования |
2001/02 (n-259) |
2003/04 (n-333) |
2005/06 (n-369) |
2007/08 (n-365) |
2009/10 (n-327) |
|
Оксациллин |
2,8% |
4,2% |
4,8% |
8,4%* |
8,0%* |
|
Эритромицин |
12,4% |
14,6% |
17,5% |
16,3% |
18,4%* |
|
Левомицетин |
9,6% |
8,4% |
10,3% |
9,6% |
10,4% |
|
Тетрациклин |
20,6% |
19,4% |
23,4% |
26,8% |
29,3%* |
|
Ко-тримоксазол |
31,4% |
33,6% |
38,4%* |
39,6%* |
44,2%* |
|
Клиндамицин |
4,3% |
2,4% |
6,0% |
4,8% |
6,3% |
* – р<0,05 в сравнении с данными, полученными в 2001/02 г.г.
Внебольничные инфекции нижних отделов респираторного тракта. При инфекционных заболеваниях нижних отделов респираторного тракта в амбулаторной практике структура выделяемых микроорганизмов зависела от установленного диагноза, возраста пациента, а также антибактериального анамнеза, предшествовавшего бактериологическому исследованию.
Streptococcus pneumoniae и Mycoplasma pneumoniae определялись наиболее часто (таблица 3). Гемофильные палочки в 2-3 раза чаще выделялись из мокроты больных с хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ) и хроническим необструктивным бронхитом, чем у больных с внебольничной пневмонией (ВП). Mycoplasma pneumoniae заметно реже обнаруживалась в мокроте больных с хроническими формами патологии.С возрастом, независимо от диагноза, увеличивалась доля пневмококков, гемофильных палочек и различных представителей семейства
Enterobacteriaceae. Роль Mycoplasma pneumoniae значительно снижалась. Вместе с тем, даже у пациентов старше 60 лет микоплазмы занимали существенную долю в общей структуре возбудителей (до 10%), что требует обязательного микробиологического мониторинга с выделением данного микроорганизма, особенно при ХОБЛ.Чувствительность основных возбудителей к ПМП.
Streptococcus
pneumoniae. Выделено 1653 штамма пневмококков. Динамика нарастания резистентности к часто используемым ПМП представлена в таблице 4. Наиболее существенными следует признать увеличение доли резистентных к пенициллинам штаммов пневмококков за весь период наблюдений практически в 3 раза. Резистентность Streptococcus pneumoniae к макролидам ежегодно имеет тенденцию к нарастанию – за 10 лет количество штаммов, нечувствительных к эритромицину увеличилось в 1,5 раза. Сохранялась высокой устойчивость пневмококков к тетрациклину и ко-тримоксазолу.Таблица 5. Количество резистентных к ПМП штаммов Mycoplasma pneumoniae, выделенных в разные годы исследования
|
Годы исследования |
2005/06 (n-39) |
2007/08 (n-36) |
2009/10 (n-56) |
|
Ципрофлоксацин |
7,7% |
5,6% |
5,7% |
|
Офлоксацин |
12,8% |
16,3% |
16,1% |
|
Эритромицин |
20,5% |
33,3% |
53,6%* |
|
Азитромицин |
18% |
19,4% |
50%* |
|
Кларитромицин |
12,8% |
19,4% |
33,9%* |
|
Тетрациклин |
5,1% |
8,3% |
13,9% |
|
Доксициклин |
5,1% |
8,3% |
13,9% |
* – р<0,05 в сравнении с данными, полученными в 2005/06 г.г.
Mycoplasma
pneumoniae. Бактериологическую диагностику микоплазмозов начали проводить с 2005 года. Проводили оценку чувствительности к ПМП микоплазм, выделенных от пациентов, проходивших лечение в стационаре. Интересным можно считать отсутствие нарастания резистентности у выделяемых штаммов Mycoplasma pneumoniae только к фторхинолоновым препаратам (таблица 5). Макролидные препараты значительно снизили свою активность в отношении микоплазм.Таким образом, в структуре возбудителей инфекций верхних и нижних отделов респираторного тракта
Mycoplasma pneumoniae занимает 2-3 место по частоте выявления. Обнаруженное нарастание резистентности микоплазм к ПМП, по всей видимости, связано с характером потребления препаратов в амбулаторной практике и селекцией пациентов, когда в стационар попадали лишь те, у которых стартовая антиботикотерапия была мало эффективна [3]. Поскольку чаще всего лечение начиналось, согласно стандартам терапии, с применения беталактамных антибиотиков, становится понятной высокая доля обнаружения Mycoplasma pneumoniae. Нарастающее применение макролидов, в свою очередь, видимо, определяет выявление значительного количества резистентных к этим антибиотикам микоплазм.Полученные результаты согласуются с выявленными фактами нарастания резистентности
Mycoplasma pneumoniae [6] в Японии. Учитывая, что в период с 2002 по 2006 год в Японии выявлено нарастание доли макролид-резистентных штаммов респираторных микоплазм (до 30,6%), выделенных у детей с внебольничной пневмонией, предложенный метод скрининга микоплазм, позволивший выявить подобную же тенденцию в нашем исследовании можно рекомендовать в практику работы бактериологических лабораторий.Выводы
1. Наиболее часто при внебольничных инфекциях респираторного тракта выделяются в ходе бактериологического исследования
Streptococcus pyogenes (тонзиллиты/фарингиты), Streptococcus pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae.2. Анализ результатов микробиологического мониторинга за последние 10 лет показал нарастание резистентности
Mycoplasma pneumoniae к макролидным антибиотикам.3. Лабораторные методы, используемые в ходе постановки диагноза и определения тактики терапии, должны включать методики быстрой детекции микроорганизмов с оценкой их чувствительности к используемым в практике ПМП.
ЛИТЕРАТУРА
1. Зубков М.Н. Сбор, транспортировка биологического материала и трактовка результатов микробиологических исследований.// Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2004.- Т.6, №2.- С.143-154.
2. Щетинин Е.В., Батурин В.А., Алиева Е.В. Стандартизация антибактериальной терапии: региональный опыт и проблемы. // Проблемы стандартизации в здравоохранении. - 2012. - №3-4. - С 28-32.
3. Щетинин Е.В., Батурин В.А., Батурина М.В. Респираторный микоплазмоз. Есть ли необходимость в оценке распространенности и эффективности противомикробных препаратов? // Проблемы стандартизации в здравоохранении. - 2012. - №1-2. - С 47-50.
4. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам (Методические указания МУК 4.2.1890-04).// Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2004.- Т.6, №4.- С.306-357.
5.
Mera R.M., Miller L.A., Daniels J.J., Weil J.G., White A.R. Increasing prevalence of multidrug-resistant Streptococcus pneumoniae in the United States over 10-year period: Alexander project. //DiagnMicrobiol Infect Dis 2005; 51(3): 195-200.6. Morozumi M., Iwata S., Hasegawa K., Chiba N., Takayanagi R. et al. Increased Macrolide Resistance ofMycoplasma pneumoniae in Pediatric Patients with Community-Acquired Pneumonia. // Antimicrobial agents and chemotherapy, 2008, Vol. 52, No. 1,p. 348–350
7. NCCLS Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. Ninth Informational Supplement. NCCLS document M100-S0. - 1999. - 19(1).
8. NCCLS Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. Eleventh Informational Supplement, M100-S11. - 2001. - 21(1).