Экдистероиды – являются стероидными гормонами, которые регулируют линьку и репродукцию членистоногих. Обнаружение в 1966 г. молекул фитоэкдистероидов в некоторых видах растений сделало их легкодоступными в достаточных количествах для исследований на млекопитающих и разработки на их основе лекарственных препаратов.

Исследования лиганд-рецепторного взаимодействия показали, что экдистероиды не связываются с рецепторами гормонов позвоночных животных. Данный факт, по-видимому, обусловлен тем, что данные соединенияпо своей структуре незначительно отличаются от стероидных гормонов млекопитающих. Несмотря на эти различия, проведенные фармакологические исследования установили влияние экдистероидов на различные физиологические процессы у млекопитающих и человека.

В экспериментах по изучению влияния экдистерона (20-Е) на экспрессию белка в клетках млекопитающих было показано, что экдистероиды стимулируют синтез белка в печени мышей за счет увеличения эффективности аппарата трансляции. Также было показано, что, введенный peros крысам, 20-Еснимает гипергликемию, вызванную либо глюкагоном, либо аллоксаном. Установлено, что экдистероиды стимулируют включение глюкозы в гликоген и белок в печени мышей и более общее расходование глюкозы в тканях. Кроме того экдистероиды являются гипохолестеринимическими агентами. Их действие заключается в уменьшении биосинтеза холестерина и увеличении его катаболизма. Результаты этих исследований явились основанием для создания нового лекарственного препарата “Экдистен”, относящегося к группе адаптогенов, и ряда БАВ на основе экдистерона.

Исследования физико-химических свойств показали, что экдистерон практически не растворим в воде, данное обстоятельство может способствовать снижению его адсорбции из желудочно-кишечного тракта и как следствие выразиться в неудовлетворительной биодоступности при высокой биологической эффективности и как следствие снижение общего фармакологического действия. Одним из решений по устранению данного недостатка может стать повышение растворимости действующего вещества в воде с помощью производных циклодекстринов.

В качестве соединений, улучшающих растворимость лекарственных веществ, в мировой практике используют циклодекстрины – олигосахариды с гидрофобной полостью и гидрофильной внешней поверхностью. Наиболее широкое практическое применение получил 2-гидроксипропил-β-циклодекстрин. Он может образовывать с лекарственными веществами “комплексы включения”, в результате чего происходит улучшение их биофармацевтических свойств (растворимость и биологическая доступность), что создает возможность уменьшить дозы действующих веществ и снизить вероятность появления побочных эффектов.

Таким образом, изучение образования комплексов включения экдистерона с 2-гидроксипропил-β-циклодекстрином имеют большое практическое значение для целей получения новых перспективных лекарственных форм, обладающих повышенной биодоступностью на основе экдистерона.

В работе использовали субстанции экдистерона с содержанием основного вещества 95% (ChemHuanDou Китай) и 2-гидроксипропил-β-циклодекстрина с содержанием основного вещества 97% (AcrosOrganics), остальные реактивы и растворители имели чистоту не ниже “х.ч.”. Все измерения проводили при комнатной температуре (25 ± 0,01)оС, эксперименты повторяли по 3 раза при проведении измерений в каждой точке не менее 2 раз, данные усредняли.

Содержание экдистерона в аликвотах определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС) с использованием жидкостного хроматографа “ThermoScientific” (модель Accela), с насосом Accela 1250 pump, встроенным дегазатором, оборудованный системой автоматического ввода пробы AccelaAutosampler с масс-спектрометрическим детектором Finnigan LXQ фирмы “ThermoScientific” с электрораспылительной ионизацией при атмосферном давлении, оснащенный хроматографической колонкой HYPERSIL GoldaQ длиной 150 мм и внутренним диаметром 2,1 мм, размер сорбента 3 мкм и ЭВМ Dell фирмы “Dellelectronics” с программным обеспечением для сбора и обработки данных XCalibur, версия 2.0.6.

На первом этапе исследований проводили выбор оптимальных условий хроматографирования и работы масс-спектрометра. В результате подобрали оптимальные условия, приведенные ниже.

Для хроматографического разделения использовали градиентный режим элюирования с применением 3-х компонентной подвижной фазы: компонент А – деионизированная вода; компонент В – ацетонитрил марки “для ВЭЖХ”; компонент C – 1% раствор муравьиной кислоты в деионизированной воде.

Температура термостата колонки была установлена 40°С, объем ввода пробы составлял 0,001 мл, время анализа – 20 мин.

Условия работы масс-спектрометра представлены в таблице 1.