|
СКАЧАТЬ (111 Кб в архиве, формат - MS Word) |
|
|
ПРИ ПУБЛИКАЦИИ МАТЕРИАЛОВ ССЫЛКА НА ИСТОЧНИК ОБЯЗАТЕЛЬНА !!! |
|
Оценка подлинности растительных экстрактов, как сырья для БАД
Cassia acutifolia Del., C. angustifolia Vahl. - Кассия остролистная и узколистная.
Комарова Е.Л., канд.фарм. наук ( ЗАО “Натуральные ингредиенты” ), Эллер К.И., доктор хим.наук, Власов А.М., Чукарина Е.В. ( ГУ НИИ питания РАМН).
Кассия – одно из широко известных растений, применяемых на всех континентах в качестве слабительного средства. Для этих целей используют листья и плоды кассии остролистной Cassia acutifolia Del., и кассии узколистной Cassia angustifolia Vahl., семейства бобовые Leguminosae (Fabaceae), которые объединяют общим наименованием сенна или александрийский лист (Senna alexandrina, Cassia Senna).
Оба вида кассии представляют собой полукустарник с прямостоячим, ветвистым стеблем и очередными сложными парноперистыми листьями с 4-8 парами узких, яйцевидно-ланцетных острых листочков. Кассия остролистная отличается от кассии узколистной тем, что у нее листочки широколанцетные, менее остроконечные, а куст более раскидистый. Плоды кассии – многосемянной боб темно-коричневого цвета.
Для применения в медицинской и пищевой промышленности используются листья и плоды кассии. Листья заготавливают при появлении желтоватого оттенка у нижних листьев растения, а бобы - при созревании.
Родина произрастания кассии – Африка, для промышленного применения растение культивируют в Индии, Китае, странах Средней Азии.
Фармакологически активные соединения, синтезируемые кассией, представляют группу производных антрацена хиноидной структуры - антраценпроизводных, состоящую из простых мономеров и их гликозидов, а также ди- и гетеродиантронов, большую часть которых составляют сеннозиды А, В, (а также реин, алоэ-эмодин, глюкореин, хризофанол, сеннозиды C, D и др.), в растении присутствуют танины и флавоноиды (изорамнетин, кемпферол, кемпферин, катехины и др.), органические кислоты, фитостерины, полисахариды.
Листья и плоды кассии применяются в качестве мягкого слабительного средства, механизм действия которого связан с раздражающим воздействием на рецепторы слизистой оболочки кишечника. Листья и плоды кассии используют для приготовления чаев, отваров, лечебных сборов. Сухие экстракты их листьев и плодов касcии включают в состав таблеток и капсул.
Стандартизацию различных препаратов, содержащих кассию, рекомендуется проводить по содержанию основных активных компонентов растения – сеннозидов А и В, присутствие которых отвечает за мягкое слабительное действие растения.
Содержание сеннозида А в листьях составляет около 0,6-0,8% в плодах – 1,5-2%. Содержание сеннозида В в листьях составляет около 0,8-1,2% в плодах – 1,5-2,1%.
ГУ НИИ питания РАМН предложена методика определения сеннозидов. В основе методики лежит селективное определение индикаторных для кассии сеннозидов А и В на фоне сложных матриксов сырья и фитопрепаратов.
Подготовка проб для анализа проводили следующим образом:
БАД и фиточаи на основе листьев и семян кассии. 1,0 г образца измельчают и помещают в круглодонную колбу с обратным холодильником, добавляют 100 мл 50% этилового спирта и нагревают на водяной бане в течение 1 часа. Затем колбу помещают на 5 минут в ультразвуковую баню. Полученный экстракт фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
БАД и препараты на основе экстракта кассии: 1,0 г образца измельчают и помещают в мерную колбу вместимостью 250 см3, доводят объем до метки 50% этиловым спиртом. Колбу помещают в ультразвуковую баню на 5 минут и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Условия хроматографического анализа:
- колонка Phenomenex Luna 5u C18(2), 5µ, 4,6Ч250 мм или аналогичная
- условия градиентного элюирования:
фаза А: трихлоруксусная кислота, рН=2,5;
фаза В: метанол;
|
Время, мин |
В, % |
|
0 |
29 |
|
20 |
65 |
- скорость подвижной фазы 1,0 мл/мин,
- детектирование: УФ, λ=340 нм.
- объем вводимой пробы 10 мкл.
Расчет концентрации сеннозидов А и В проводят по градуировочному графику, или рассчитывают по формуле:
X%= (C•S1•V•100%)/ S2•M
где, С – концентрация стандартного раствора, мг/мл;
S1 –площадь пика в анализируемой пробе;
S2 – площадь пика в стандартом образце;
V – общий объем экстракта, мл;
М – масса навески, мг;
Метрологические характеристики методики определения сеннозидов А и В
|
Вещество |
Х |
s2 |
s |
P |
t(Р, f) |
∆x |
Ε |
|
Сеннозид А Сеннозид В |
51,3 52,3 |
1,2679 1,7399 |
1,126 1,319 |
95% 95% |
2,78 2,78 |
1,40 1,64 |
2,73% 3,14% |
При данных условия предел обнаружения (соотношение сигнал:шум 1:3) составил 1мг/л, что соответствует 0,025% сеннозидов в продуктах на основе сенны.
С помощью вышеописанной методики ВЭЖХ были проанализированы образцы сырья кассии для производства БАД (трава и сухие экстракты кассии), а также некоторые фитопрепараты, на основе сырья кассии. Результаты анализа представлены в таблице
Результаты анализа сырья и фитопрепаратов, содержащих кассию (методика ВЭЖХ):
|
№ |
Наименование образца |
Содержание сенозидов, в мг/гр (%) (ВЭЖХ) |
|
|
Сеннозид А |
Сеннозид B |
||
|
1 |
Трава сенны |
16,62 мг/г |
13,94 мг/г |
|
2 |
Экстракт кассии сухой SL060703 |
28,03 (2,8%) |
68,70 (6,9%) |
|
3 |
Экстракт кассии сухой SL060126 |
32,1 (3,2%) |
10,6 (1,1%) |
|
4 |
Экстракт кассии сухой SL060201 |
28,84 (2,9%) |
7,01 (0,7%) |
|
5 |
Экстракт кассии сухой SL050110 |
29,33 (2,9%) |
7,38 (0,7%) |
|
6 |
Экстракт кассии сухой 0601-1 |
9,07 (0,9%) |
6,93 (0,7%) |
|
7 |
БАД к пище “Жизнетон очищение”, капсулы |
0,15 мг/кап |
0,18 мг/кап |
|
8 |
БАД к пище “Ред слим фруктовый” с ароматом клубники, ф.п. |
2,87 мг/ф.п. |
6,94 мг/ф.п. |
|
9 |
БАД к пище “Ред слим фруктовый” с ароматом вишни, ф.п. |
2,87 мг/ф.п. |
6,78 мг/ф.п. |
|
10 |
БАД к пище “Ред слим фруктовый” с ароматом персика, ф.п. |
2,64 мг/ф.п. |
5,97 мг/ф.п. |
|
11 |
БАД к пище “Грациола-Норм”, капсулы |
0,19 мг/кап |
0,11 мг/кап |
|
12 |
БАД к пище “Грациола-Норм”, таблетки |
0,15 мг/таб |
0,33 мг/таб |
|
13 |
БАД к пище “В-МИН-ОО”, таблетки |
1,32 мг/таб |
0,61 мг/таб |
|
14 |
БАД к пище “Супер-дренаж-2”, таблетки |
0,76 мг/таб |
0,21 мг/таб |
|
15 |
БАД к пище “Фибракс”, таблетки |
0,93 мг/таб |
0,74 мг/таб |
|
16 |
БАД к пище “Диетактив” |
2,24 мг/кап |
0,56 мг/кап |
Результаты проведенных анализов показали, что разработанная методика ВЭЖХ позволяет достоверно провести определение индикаторных компонентов сенны, а также характеризовать качество сырья и фитопрепаратов на основе кассии.