СКАЧАТЬ (188 Кб в архиве, формат - MS Word)

"Рынок БАД" №4(30) август/сентябрь, 2006

ПРИ ПУБЛИКАЦИИ МАТЕРИАЛОВ ССЫЛКА НА ИСТОЧНИК ОБЯЗАТЕЛЬНА !!!

ПОДПИСКА НА ЖУРНАЛ

Оценка подлинности растительных экстрактов, как сырья для БАД.

Melissa officinalis L. - Мелисса лекарственная.

Комарова Е.Л., канд.фарм. наук ( ЗАО “Натуральные ингредиенты” )

Власов А.М., Чукарина Е.В., Эллер К.И., доктор хим.наук ( ГУ НИИ питания РАМН)

Мелисса лекарственная (Mellissa officinalis L.), английское наименование растения Lemon Balm – это многолетнее растение семейства Яснотковые (Lamiaceae). Имеет четырехгранный, прямостоящий, ветвистый стебель высотой до 120 см, листья супротивные, по краям зубчатые, с верхней стороны темно-зеленые, снизу - более светлые, покрыты железистыми волосками. Цветки мелкие, беловатого или розового цвета, собраны в ложные мутовки, расположенные в пазухах верхних листьев. Растение имеет душистый лимонный запах, а также заметный лимонный привкус. Родина мелиссы – Средиземноморье, для промышленных целей растение культивируют в странах Южной Европы и Ближнего Востока.    

Это одно из наиболее популярных лекарственных и ароматических растений в традиционной медицине Европы. Помимо эфирного масла мелиссы, которое высоко ценится в пищевой и медицинской промышленности, благодаря приятному аромату, способности улучшать аппетит, оказывать успокаивающее и противомикробное действие, из мелиссы также производят сухой экстракт. Технология производства сухого экстракта мелиссы включает не только выделение экстрактивных веществ из листьев и травы растения, но и максимальное сохранение летучих компонентов, несмотря на сравнительно невысокое его содержание в исходном сырье (от 0,02 до 0,2%).

В составе эфирного масла мелиссы присутствуют цитраль (до 60%), цитронеллаль, мирцен, гераниол, линалоол, цинеол. Также растение содержит другие ценные биологически активные вещества, это фенолокислоты - розмариновая кислота, этиловый эфир розмариновой кислоты, хлорогеновая кислота, кофейная кислота, а также танины, катехины, лютеолин-7-О-гликозид, рамназин, апигенин-7-О-гликозид, тритерпеноиды - олеаноловая, урсоловая кислоты, даукостерин и др.

Фармакологическая активность мелиссы к настоящему времени изучена достаточно детально. Это высокая антиоксидантная активность, а также седативное, антидепрессатное действие, спазмолитическая, противовирусная и антибактериальная активность, антитиреотропный эффект. Рекомендуемые дозировки стандартизованного экстракта мелиссы лекарственной (содержание розмариновой кислоты не менее 3%) составляют около 160-200 мг за 30 мин - 1 час до сна.

Выраженная противовирусная и противомикробная активность обусловлена присутствием в растении танинов, тримеров кофейной кислоты, а также группы фенилпропаноидов (розмариновая кислота и др).

Согласно проведенным исследованиям, экстракт мелиссы лекарственной заметно ускоряет время заживления язв вирусного герпеса в области рта, а также показывает способность блокировать распространение вирусов.

Флавоноиды, фенилпропаноиды и танины мелиссы отвечают не только за антигерпесную активность, но также за противоопухолевую (подавление синтеза белка в раковых клетках) и тиреоидно-регуляторную активность. В ходе лабораторных исследований было обнаружено, что экстракт мелиссы эффективен при лечении болезни Грейвса. Активные компоненты мелиссы блокируют антитела, а также действие тироид-стимулирующего гормона, препятствуя стимуляции увеличения щитовидной железы.

Для оценки качества и стандартизации БАД содержащих мелиссу нами предложен метод ВЭЖХ. В качестве стандартного вещества использована розмариновая кислота, которая является индикаторным компонентом, характеризующим подлинность мелиссы лекарственной, и позволяет идентифицировать мелиссу от похожих на нее растений, таких как котовник кошачий и котовник крупноцветковый, не содержащих розмариновую кислоту. Помимо мелиссы лекарственной, розмариновая кислота может быть использована для стандартизации экстрактов розмарина лекарственного (Rosmarinus officinalis L.), в небольших количествах она встречается также в мяте перечной, змееголовнике молдавском и почечном чае.

Рис. 1. Розмариновая кислота

Рис.2. ВЭЖХ-хроматограмма сухого экстракта розмарина R040201 с содержанием розмариновой кислоты 4%

Рис.3. Хроматограмма водно-спиртового экстракта мелиссы с содержанием розмариновой кислоты 13%

Методика определения розмариновой кислоты методом ВЭЖХ.

В 100 мл круглодонную колбу помещают около 1,0 г измельченного растительного сырья или препарата на основе растительного сырья, или 0,1 г сухого экстракта или навеску готового продукта, соответствующую 0,1 г сухого экстракта. Далее прибавляют 100 мл 60% метанола, перемешивают и нагревают на водяной бане с обратным холодильником 30 минут, затем озвучивают на ультразвуковой бане и отфильтровывают. Аликвоту от полученного раствора фильтруют через мембранный фильтр 0,45мкм и используют для анализа методом ВЭЖХ.

Хроматографическая система:

Колонка

Состав подвижной фазы

Скорость ПФ

Температура колонки

Детектирование

250 × 4,6 мм Phenomenex Luna 5u C18(2), США

ГРАДИЕНТ А-0,1%фосфорная кислота; В-Ацетонитрил; 0мин-12%В, 25мин-50%В

1мл/мин

250С

СФМ λ=330нм

Параметры разделения:

Индикаторный компонент

tR, мин.

K

N

Розмариновая кислота

13,111

5,243

49469

Где tR, мин – время удерживания, К – коэффициент емкости колонки, N- число теоретических тарелок.

Метрологические характеристики методики количественного определения розмариновой кислоты в фиточаях и БАД:

Наименование компонента

Х

s2

s

P

t(Р, f)

∆x

Ε

Розмариновая кислота

31,2

0,4037

0,630

95%

2,78

0,79

2,54 %

 

 

 

Параметры количественного определения розмариновой кислоты.

Наименование компонента

Предел обнаружения, мг/л

1:3

Предел количественного определения мг/л

1:20

Диапазон линейных концентраций мг/л

Параметры линейной регрессии

Уравнение сглаживающей прямой (у-площадь пика, х содержание в-ва мг/мл)

Коэфф ициент корреляции

Розмариновая кислота

 

0,3

1,5

1-1000

y=20727x-579

0,9875

Содержание определяли по формуле или методом абсолютной калибровки по градуировочному графику.

С – концентрация соответствующего стандартного раствора, мг/мл;

S1 – площадь пика розмариновой кислоты в анализируемой пробе;

S2 – площадь пика стандарта розмариновой кислоты;

V – общий объем экстракта, мл;

m – масса навески, мг;

Данная методика была использована при стандартизации ряда продуктов, содержащих мелиссу лекарственную и розмарин лекарственный, нами были получены следующие результаты:

Таблица. Содержание розмариновой кислоты в готовой продукции БАД и сырье, для изготовления БАД на основе мелиссы лекарственной и розмарина лекарственного

Наименование образца

Содержание розмариновой кислоты в образце

Трава мелиссы

0,24 мг/г

Сухой экстракт мелиссы, серия 000666/06

29,87 мг/г

Сухой экстракт мелиссы 5:1, серия 240706-5

60,48 мг/г

Сухой экстракт мелиссы 7:1, серия 240706-7

77,63 мг/г

Сухой экстракт розмарина R040201

40,98 мг/г

Сухой экстракт розмарина, 20040325

12,55 мг/г

Сухой экстракт розмарина - антиоксидант карнозиновая кислота 25%, серия RME050816

0,59 мг/г

Ароматическая добавка к чаю “Тихая ночь”, сырье

0,10 мг/г

БАД к пище “Комплексная очистка дыхания”, таблетки

2,50 мкг/таб

БАД к пище “Бальзам безалког. “Алтайские травы №1”, сироп

2,60 мг/100 г

БАД к пище “Бальзам безалког. “Алтайские травы №4”, сироп

9,40 мг/100 г

БАД к пище “Бальзам безалког. “Алтайские травы №7”, сироп

0,50 мг/100 г

БАД к пище “Бальзам безалког. “Алтайские травы №9”, сироп

1,70 мг/100 г

БАД к пище “Бальзам безалког. “Алтайские травы №10”, сироп

3,20 мг/100 г

БАД к пище “Бальзам безалког. “Алтайские травы №11”, сироп

0,10 мг/100 г

Таким образом, предложенный метод анализа позволяет повести оценку качества растительного сырья, технических полупродуктов и готовой продукции Мелиссы лекарственной, а также ряда других растений, включая водорастворимые экстракты из Розмарина лекарственного, активными компонентами которых являются фенилпропаноиды, включая розмариновую кислоту и ее производные.