В течение нескольких последних лет при финансовой поддержке Правительства Москвы действуют научно-технические программы, включающие в себя работы по созданию и исследованию свойств биологически активных средств широкого спектра действия.

В результате выполнения программ была, например, создана биологически активная добавка "Антиоксифит", которая обладает выраженным детоксицирующим, общеукрепляющим, антиоксидантным и антиканцерогенным действием, то есть целым комплексом свойств, необходимых для профилактических и лечебных препаратов, в том числе препаратов для онкологических больных.

Клинические испытания БАД "Антиоксифит" у больных онкологического и неонкологического профиля подтвердили ее высокую эффективность.

Широкие медико-биологические исследования, выполненные в рамках программ, показали перспективность выбранного направления и обозначили пути его успешного развития.

Очевидно, что применение БАД в онкологии ограничивается недостатком квалифицированно проведенных исследований, позволяющих сделать заключение об их эффективности и безопасности.

В 2000 году нами были начаты исследования по разработке новых лечебно-профилактических биологически активных средств на основе лекарственных растений.

Оценка антиоксидантной активности in vitro и противоопухолевого действия in vivo экстрактов ряда лекарственных растений вывили высокую антиоксидантную активность сухих экстрактов травы герани луговой и выраженное ингибирующее действие экстрактов календулы в отношении роста различных по гистологической структуре перевивных опухолей у животных.

Это позволило начать в 2001 году работы по созданию нового биологического средства, которое сочетало бы в себе детоксицирующие свойства, за счет высокой антиоксидантной активности герани, и противоопухолевое действие календулы.

Изучение детоксицирующего действия экстрактов были проведены на мышах BDF1, самках массой 20 - 25 г, полученных из питомника РАМН "Столбовая".

С учетом высокой антиоксидантной активности экстрактов герань-календула для сравнительного изучения их детоксицирующего действия нами были использованы две модели токсикоза, обусловленного развитием в организме животных окислительного стресса. В первой модели индукция окислительного стресса вызвалась путем введения бинарной каталитической системы (оксикобаламин+аскорбиновая кислота), при взаимодействии компонентов которой происходит образование высокоактивных перекисных соединений и гидроксил-радикалов. В этом случае детоксицирующее действие экстрактов оценивали по гибели животных от токсичности. Во второй модели индукция стресса была обусловлена ингибированием монооксигеназной системы печени при введении четыреххлористого углерода. Детоксицирующее действие экстрактов оценивали по продолжительности тиопенталового сна у животных.

Проведенные исследования показали, что экстракт герань-календула обладает выраженными детоксицирующими свойствами, что коррелирует с данными об антиоксидантной активности, полученными in vitro.

Представлялось интересным оценить эффективность in vivo детоксицирующего действия экстракта в условиях модели, приближенной к клинической ситуации - на токсическое и терапевтическое действие широко применяемых в клинической практике цитостатиков: 5-фторурацила (5-ФУ), доксорубицина (ДР) и цис-дихлородиаминоплатины (II) (ДДП) у животных с лимфоидной лейкемией Р-388.

Цитостатики в сочетании с экстрактом вводили животным однократно в двух разовых дозах - в терапевтической дозе и в дозе, превышающей терапевтическую и приводящей к 50% гибели животных.

В результате проведения исследования было установлено, что при токсикозе, индуцированном введением цитостатиков у животных с лимфоидной лейкемией Р-388 экстракт герань-календула оказывает протекторное действие в отношении токсических эффектов 5-ФУ и ДР, без снижения терапевтической эффективности 5-ФУ, ДР, ДДП.

Исследования влияния экстрактов на рост различных по гистологической структуре метастазирующих и неметастазирующих опухолей позволяют оценить безопасность применения БАД у онкологических больных.

Исследования проведены на мышах BDF1, самках, и мышах F1(CBA´ C57Bl/6), самках, полученных из питомника Столбовая РАМН.

Опухолевые штаммы (аденокарцинома молочной железы Са-755, аденокарцинома легкого Льюис и меланома В16 в солидных вариантах, лейкемия Р-388 и лейкемия L1210 в асцитных вариантах) были получены из банка перевивных опухолей ОНЦ РАМН.

Влияние БАД на рост опухолей оценивали по торможению роста опухоли, по средней продолжительности и увеличению продолжительности жизни животных.

Влияние на метастатическую активность опухолей карциномы легкого Льюис (LLC) и меланомы В-16 оценивали по массе легких, по торможению метастазирования, по степени поражения легких метастазами.

Влияние на метастатическую активность лейкемии Р-388 оценивали по объему и массе лимфатических узлов – пахового, близлежащего к опухоли, и пахового колатерального от опухоли, а также подмышечных узлов.

В результате проведенных исследований показано, что многократное пероральное введение экстрактов герань - календула животным с перевивными злокачественными опухолями не стимулирует рост асцитной и солидной форм лейкемии L1210, лейкемии Р-388, карциномы молочной железы Са755, карциномы легкого Льюис, меланомы В-16, а также не стимулирует метастатическую активность карциномы легкого Льюис и меланомы В-16.

Таким образом, в соответствии с информацией, полученной при изучении свойств сухого экстракта герань-календула, был сделан вывод о перспективности этого продукта, как антиоксидантного, детоксицирующего и общеукрепляющего средства при различных нозологических формах заболеваний, в том числе онкологических. Наиболее интересным для дальнейшего клинического исследования этой БАД является оценка эффективности ее использования онкологическими больными, находящимися на химиотерапевтическом лечении.

Одним из новых направлений, появившихся в нашей работе в 2001 г, стало исследование свойств сухого экстракта курильского чая (пятилистника кустарникового). В индо-тибетской, а также монгольской медицине отвары и настои этого кустарника широко используются при желудочно-кишечных заболеваниях. В народной медицине курильский чай применяется как кровоостанавливающее, противовоспалительное и успокаивающее средство.

Широкий спектр биологически активных соединений, присутствующих в пятилистнике кустарниковом, делает это растение крайне привлекательным для использования в составе лечебно-профилактических парафармацевтиков.

В нашей работе была исследована способность сухого экстракта курильского чая повышать устойчивость организма к гипоксии.

Согласно современным представлениям, гипоксия – широко распространенное явление, возникающее как в условиях дефицита кислорода во внешней среде, так и в результате самых разных патологий, обусловленных нарушением функций дыхательной, сердечно-сосудистой систем и транспортной функции крови. Во всех этих случаях происходит снижение доставки кислорода к органам и тканям до уровня, недостаточного для поддержания структуры, метаболизма и функции клетки. Гипоксическая компонента является обязательным патогенетическим фактором практически любой патологии (воспаления, инфекции, интоксикации, лучевые поражения, гипоавитаминоз, гормональные нарушения, энцефало-, кардио- и миопатия и т.д.). Именно это определяет постоянно нарастающий интерес к проблеме защиты организма от гипоксии с помощью антигипоксантов – средств, которые предупреждают или ослабляют воздействие на организм дефицита кислорода. Эти средства могут использоваться в экстремальных ситуациях, связанных с острой кислородной недостаточностью (медицина катастроф, спортивная и военная медицина), нарушением функции массопереноса крови, а также в качестве средств профилактики и комплексной терапии при общей или регионарной гипоксии и ишемии жизненно важных органов. Арсенал таких средств достаточно ограничен, что предопределяет актуальность поиска новых антигипоксантов.

В последние годы особое внимание фармакологов привлечено к лекарственным средствам растительного происхождения.

В связи с вышесказанным нами были проведены исследования влияния экстракта курильского чая (ЭКЧ) на резистентность (устойчивость) организма к кислородной недостаточности. В качестве критериев оценки были выбраны параметры выживаемости животных при моделировании гипоксии ("Методические рекомендации по доклиническому отбору антигипоксантов" МЗ РФ, 1990 г), а также ряд важнейших показателей общего функционального состояния организма (двигательная и ориентировочно-исследовательская активность, состояние дыхательной компоненты и т.п.).

Подбор максимально эффективной дозы ЭКЧ и оценка широты его действия проводились при традиционно принятом способе введения препарата в условиях доклинических исследований – внутрибрюшинном, а затем было поведено сопоставление полученных эффектов ЭКЧ при пероральном введении, которое, как предполагается, должен быть основным. Учитывая, что препарат предлагается для длительного применения, были изучены особенности его влияния на организм, как при однократном введении, так и при курсовом применении.

По ходу исследования были выявлены положительные эффекты ЭКЧ на организм не только в гипоксических, но и в нормобарических условиях, поэтому было проведено изучение действия экстракта на организм при нормальном содержании кислорода в окружающей среде.

Работа проводилась по трем основным направлениям.

Подбор эффективных доз ЭКЧ, оказывающих защитное (антигипоксическое) действие в условиях острой гипобарической гипоксии.

Изучение антигипоксического действия ЭКЧ при однократном, пероральном профилактическом введении в максимально эффективной дозе (выживаемость животных, двигательно-исследовательская и дыхательная активности, параметры энергетического обмена).

Изучение антигипоксического действия ЭКЧ при курсовом применении (30 дней) в максимально эффективной дозе (выживаемость животных, масса тела и стресс-компетентных органов, двигательно-исследовательская и дыхательная активности, параметры энергетического обмена).

В процессе работы эксперименты проводили in vivo на беспородных белых крысах-самцах массой 220-280 г, содержащихся в стандартных условиях вивария на стандартном пищевом рационе.

Антигипоксические свойства ЭКЧ оценивали на одной из наиболее применяемых экспериментальных моделей гипоксии - острой гипобарической гипоксии (подъем в барокамере на "критическую высоту" - 11 000 м, на которой происходит гибель 70-80 % животных в течение первых 30 мин).

Острую гипобарическую гипоксию моделировали в проточной барокамере при Т воздуха 20-22^оС. Эксперименты проводили при минимальном разрежении воздуха (145 мм. рт. ст. – "критическая высота" – 11 000 м). Разрежение создавали с помощью вакуумного насоса при скорости разрежения воздуха (скорость подъема на "высоту") 50 м/сек.

Анализ полученных при проведении исследований результатов позволил сформулировать следующие основные выводы.

Однократное применение ЭКЧ в эффективной дозе снижает тревожность крыс в нормоксических условиях, связанную новизной обстановки (анксиолитический эффект) и увеличивает латентный период проявления потери позы и время жизни на "критической высоте" (антигипоксическое действие). Экстракт нормирует двигательную активность и тревожность крыс в условиях гипоксии нарастающей тяжести практически во всем диапазоне исследованных высот (психомодулирующий, антигипоксический и адаптогенный эффекты) и снижает начальную двигательную активность на "субкритической высоте", препятствуя при этом ее дальнейшему подавлению. Предотвращается развитие в условиях острой гипобарической гипоксии запредельного торможения (каталептоидных состояний) (антигипоксическое, антистрессорное седативное действие, экономизация двигательной активности), а также снижается частота дыхания на "субкритической высоте" и предупреждается развитие в этих условиях тяжелых нарушений дыхания апнотического и судорожного типа. В постгипоксический период нормируется эмоциональная сфера животных и наблюдается слабое активирующее действие на аэробный энергетический обмен, способствуя экономизации энергодающих процессов. Происходит нормирование функционального паттерна животных.

Исследование эффектов курсового применения ЭКЧ выявило его модулирующее действие в нормоксических условиях на базисный паттерн двигательно-исследовательской активности крыс с нормирующим эффектом (сужением спектра индивидуальных различий между животными по изучаемым параметрам). Установлено также тонизирующее (психоактивирующее), анксиолитическое и антистрессорное действие на животных, активация и стабилизация дыхания.

В условиях субпороговой, пороговой и субострой гипоксии курсовое пероральное применение ЭКЧ снижало двигательную активность животных, оказывало анксиолитическое действие, более сильно выраженное, чем при однократном применении ЭКЧ, а также способствовало увеличению порога чувствительности животных к гипоксии, т.е. увеличению их резистентности к кислородной недостаточности.

Следует особо отметить, что при оценке антигипоксических свойств ЭКЧ при курсовом его приеме исследования проводили через сутки после последнего его введения. При этом положительные и защитные эффекты ЭКЧ в ряде случаев были выражены сильнее, чем при однократном приеме ЭКЧ. Все это говорит о том, что под влиянием курсового приема ЭКЧ в организме формируется структурный след, способствующий проявлению "отставленных во времени эффектов" ЭКЧ и указывающий на адаптогенный характер его действия.

Курсовое пероральное применение ЭКЧ предотвращало или снижало нарушения двигательной активности и уменьшало нарушения дыхания, вызванные субострой гипобарической гипоксией, а также облегчало ее переносимость крысами, т.е. оказывало антигипоксический эффект, степень выраженности которого зависела от индивидуальной чувствительности животных к дефициту кислорода.

Таким образом, курсовое применение ЭКЧ способствовало улучшению целого ряда показателей психоэмоциональной сферы и дыхания как в нормоксических, так и в гипоксических, стрессовых условиях.

Анализ полученных результатов позволил сформулировать основные показания к применению экстракта курильского чая:

- использование курсового применения ЭКЧ внутрь в качестве тонизирующего средства, нормирующего двигательную и дыхательную активность и эмоциональную сферу, а также как мочегонного и обезвоживающего средства в нормоксических условиях для широкого контингента лиц, в том числе пожилого возраста;

- использование курсового применения ЭКЧ внутрь в спортивной и военной медицине для увеличения неспецифической резистентности организма;

- использование однократного применения ЭКЧ внутрь в экологически неблагоприятных условиях, сопровождающихся возникновением резкого дефицита кислорода в окружающей среде.

На БАД "Экстралайф – сухой экстракт курильского чая" получено Регистрационное удостоверение Министерства здравоохранения РФ № 003563.Р.643.12.2001.