Попова И. Ю., Басченко Н.Ж., Зарудий Ф.С.

Выраженные гепатопротекторные и мембраностабилизирующие свойства таких растений, как калина, календула, облепиха и солодка, позволили выбрать к исследованию экстракты этих растений, полученные экстракцией сверхкритическими углекислотными (СК-СО₂) флюидами в OОO НИЦ ЭР “ГОРО”.

Технология СК-СО2 экстракции позволяет получать концентрат биологически активных веществ (БАВ) практически с сохранением полного природного соотношения и тончайших биохимических нюансов, присущих растению. При этом выход концентрата с такими нутрицевтическими характеристиками достаточно высок. Сравнительное исследование химического состава экстрактов показало, что СК-СО₂ экстракция позволяет извлечь из исходного растительного сырья БАВ, наиболее полно отвечающие природному составу растения [4].

Целью данной работы было изучение гепатопротекторной, желчегонной и антиоксидантной активности экстрактов календулы, калины, облепихи и солодки, и на фоне токсического поражения печени 4-хлористым углеродом по сравнению с известными официальными препаратами – карсилом и эссенциале, а также исследование острой токсичности СК-СО₂ экстрактов.

Опыты проводили на белых беспородных крысах массой 200 г. Поражение печени вызвали подкожным введением 50%-го масляного раствора 4-хлористого углерода в течение 4 дней. Экстракты вводили внутрижелудочно в дозе 0,5 мл (50% масляного раствора) на животное весом 200 г в течение 7 дней, после воспроизведения гепатита. Референс-препараты вводили в терапевтических дозах: карсил в дозе 2,1 мг/кг, рассчитанной по силимарину (Sopharma, Болгария), эссенциале в дозе 15 мг/кг по эссенциальным фосфолипидам (SBS Bosnalijek, Югославия), масло облепихи 50% раствор (ОАО “Уфавита”), сироп солодкового корня 4% (“Татхимфармпрепараты”) [4]. Контрольной группе (гепатит) вводили 0,5 мл подсолнечного масла, интактным животным – дистиллированную воду. Уровень маркерных ферментов, желчегонную и антиоксидантную активность изучали на 8-е сутки лечения. АлАТ и АсАТ, ЩФ определяли, используя наборы биохимических реактивов “Лахема” (Чехия); общий белок в сыворотке крови определяли по биуретовому методу (набор химреактивов, г. Екатеринбург); скорость перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по накоплению в гомогенате печени малонового диальдегида (МДА) и его реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой.

Установлено, что все изучаемые экстракты способствуют более быстрому восстановлению уровня маркерных ферментов крови (АлАТ, АсАТ). Так, экстракты календулы, облепихи и солодки достоверно (0,35±0,03; 0,36±0,03; 0,33±0,02 мкМоль/л·ч, Р<0,05) уменьшают уровень содержания АлАТ в сыворотке крови по сравнению с контролем (CCl4-гепатит) и препаратами сравнения (карсилом и эссенциале), приблизительно, в 1,2 раза. Уровень АсАТ быстрее восстанавливался в сыворотке крыс, получавших в течение 7 дней экстракты календулы, калины и облепихи (0,60±0,02; 0,53±0,10; 0,53±0,05 мкМоль/л·ч) и соответствовал уровню АсАТ в сыворотке крыс, получавших препараты сравнения – карсил и эссенциале (0,63±0,06 и 0,51±0,03 мкМоль/л·ч, соответсвенно). Этот показатель был в 1,3 раза ниже по сравнению с контролем (CCl₄-гепатит) (0,75±0,05 мкМоль/л·ч).

Активность щелочной фосфатазы, фермента цитолиза при лечении экспериментального гепатита СК-СО₂ экстрактами изменяется по сравнению с контролем (CCl₄-гепатит) незначительно. Содержание общего белка в сыворотке крыс с острым токсическим гепатитом не изменяется и остается в пределах нормы.

Перекисное окисление липидов играет существенную роль в развитии многих патологических состояний. Мембранотоксичность многих соединений, в том числе ССl₄, связана с активацией ими перекисного окисления липидов [5]. Проведенные исследования показывают, что все исследуемые экстракты обладают выраженной способностью ингибировать ПОЛ печени: накопление МДА при использовании экстрактов календулы и калины снизилось на седьмой день лечения до уровня 0,263±0,02 и 0,263±0,03 мМоль/г печени, что почти в 2 раза ниже уровня МДА в группе контроля (ССl4), и соответствовало уровню МДА в группах, получавших карсил и эссенциале (0,273±0,03 и 0,278±0,01 мMоль/г). Применение экстракта солодки понизило содержание МДА в гомогенате печени по сравнению с карсилом, эссенциале и контролем (ССl₄) в 1,3 и 2,6 раза, соответственно.

Желчегонную активность исследуемых экстрактов оценивали по желче-секреторной (мг/мин на 100 г массы) и желчевыделительной (общее количество желчи за 4 часа в мг на 100 г) функциям гепатоцитов при токсическом поражении печени ССl₄.

Как показали исследования, все изученные экстракты обладают выраженной желчегонной активностью, которая выражается в увеличении секреции и выделении желчи гепатоцитами. Так, средняя скорость секреции за 4 часа в группах, получавших СК-СО₂ экстракты калины, солодки и облепихи, составила 3,42±0,4; 2,90±0,2 и 2,49±0,4 мг/мин на 100 г массы, а при введении экстракта календулы – 4,47±0,7 мг/мин на 100 г массы, что почти в 1.8, 1.6, 1.3 и 2.4 раза выше контроля (ССl4) 1,86±0,51 (мг/мин на 100 г массы), соответственно. Общее количество желчи, выделившееся за 4 часа в группах, получавших экстракты, было почти 1.5 раза выше, чем в контроле и в группах, получавших карсил и эссенциале.

На основании полученных данных можно сделать вывод, что СК-СО₂ экстракты календулы, калины, облепихи и солодки оказывают выраженное гепатозащитное действие. Под влиянием СК-СО2 экстрактов уменьшается выраженность биохимических синдромов поражения печени, тормозится перекисное окисление липидов и нормализуется интенсивность секреции и выделения желчи.